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建设PCR实验室

2022年12月06日 22:17:48
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建设PCR实验室插图

PCR技术(Polymerasechainreaction,PCR)是聚合酶链式反应的英文简称。

它是分子生物学中应用最为广泛的实验方法之一。

它由DNA重组、RNA的合成和蛋白质的体外重组等3个部分组成,

其中最重要的是PCR-DNA重组和PCR-蛋白质合成两部分。

PCR技术的基本原理:在特异引物的引导下与靶序列互补的特异性单链核苷酸序列以自身为模板,按碱基配对原则形成一条多核苷酸链,然后使这条单链沿着模板移动一段随机距离后与靶标dna结合即得到目的产物(mrna或蛋白)。

基因扩增的原理:将外源基因通过限制性内切酶的消化作用切割成小片段后导入细胞进行培养;经过一定时间培养后,由于外源基因的表达而使得细胞产生大量的转化子;再把这些转化子转入特定的载体中进行表达操作;最后把表达的产物用特定的方法从受体细胞的细胞膜上洗脱下来从而获得目的基因的表达产物。

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